Ulei de imersie: compoziție, caracteristici, fundație și utilizare

Uleiul de imersie este un lichid vâscos și transparent care are un indice de refracție ridicat. Din acest motiv, este folosit pe scară largă în observațiile microscopice, deoarece oferă proprietatea de a concentra lumina atunci când trece prin obiectivul 100X al microscopului, crescând puterea sa de rezolvare.

Acest lucru se întâmplă datorită formării unui film vâscos între țintă și frotiu, împiedicând razele luminoase să se disperseze atunci când ajung în aer, concentrând fasciculele luminoase spre proba.

Uleiul de imersie este utilizat numai cu obiectivul 100X. De aceea, obiectivul 100X este numit și obiectiv de imersiune. Restul sunt cunoscute ca ținte uscate. Acest obiectiv nu poate fi utilizat fără uleiul de imersie, deoarece fără ea vizualizarea nu ar fi satisfăcătoare.

Funcția principală a uleiului de imersie este de a oferi imagini mai clare, mai clare și mai definite, permițând observarea detaliilor care nu ar fi posibile cu alte obiective.

Primul ulei utilizat în acest scop a fost uleiul de anason, folosit împreună cu primul obiectiv de imersiune creat de Giovanni Battista Amici. Acest lucru a evitat numai aberația cromatică, dar nu a crescut apertura numerică a sistemului obiectiv.

Apoi, ulei de cedru a fost folosit, dar a prezentat numeroase dezavantaje care i-au forțat utilizarea. Printre acestea a fost aciditatea ridicată, care a afectat obiectivele pe termen scurt.

Ulterior, s-au folosit alte substanțe cum ar fi apă și glicerină până când s-au creat uleiuri de imersie sintetice, care au fost rafinate treptat până la atingerea uleiului de imersie curent, care este un compus complex de substanțe organice.

Compoziție de ulei de imersie

Uleiul de imersie este constituit dintr-un amestec de compuși organici cum ar fi: terfenil, terfenil hidrogenat, hidrocarburi naturale și polibuteni.

Caracteristicile uleiului de imersie

Uleiul de imersie este un lichid galben deschis, ușor vâscos, cu un miros caracteristic și densitate între 0, 92 și 0, 99 g / cm3.

Uleiul de imersie nu este solubil în apă și are un punct de fierbere de 340 ° C. Indicele de refracție a (n 20 ° C / D): variază de la 1.482 la 1.516. În același timp, indicele inflamației este de 110 ° C, iar vâscozitatea oscilează între 100 și 120 mPa.s.

Acest produs trebuie eliminat corespunzător, deoarece este ecotoxic. Asta este, este dăunător mediului, care afectează în principal animalele acvatice. Pe de altă parte, este iritant pentru piele și mucoase. Dacă este ingerat, este nefrotoxic și cardiotoxic.

Uleiul de imersie este stabil la 15 până la 25 ° C, temperatura la care trebuie depozitat.

Bazele uleiului de imersie

Atunci când se utilizează lentile de mărire superioare, intensitatea luminii trebuie mărită. Cu toate acestea, multe dintre grinzile de lumină se pierd deoarece sunt împrăștiate atunci când ajung în aer (spațiul dintre copertă și lentilă) și chiar unele raze suferă o reflexie totală.

Uleiul de imersie are un indice de refracție similar celui din sticlă. Prin urmare, atunci când uleiul este contactat între obiectivul 100X și capacul de acoperire, fasciculele luminoase sunt concentrate.

Razele concentrate traversează proba și măresc claritatea imaginii, adică cresc deschiderea numerică a obiectivului și corectează aberațiile cromatice și sferice.

Utilizări sau aplicații

Utilizarea uleiului de imersie este necesară în mod special atunci când este necesar să se observe o imagine într-o manieră mai largă, folosind obiectivul de mărire mai mare (obiectivul 100X) și astfel să poată vedea detaliile esențiale pentru stabilirea unui diagnostic.

Prin urmare, este utilizat pe scară largă în studii microscopice din diferite domenii, cum ar fi: histologie, citologie, hematologie și bacteriologie. De exemplu, este utilă pentru studierea caracteristicilor celulelor și țesuturilor unui pacient.

De asemenea, servește pentru analiza frotiurilor de sânge, unde vrem să detaliem caracteristicile hemoparazitelor din interiorul și exteriorul eritrocitelor, precum și în preparatele Gram, pentru a defini caracteristicile morfo-mentoriale ale microorganismelor.

Este de obicei utilizat în preparate fixe, deoarece nu este recomandat în preparatele proaspete. Acest lucru se datorează faptului că tensiunea superficială a uleiului determină mutarea mucegaiului, ceea ce determină mutarea probei în timpul observării și prevenirea analizei sale.

Pe de altă parte, uleiul de imersie nu este util numai în microscopia optică convențională: este utilizat, de asemenea, în microscoapele cu fluorescență totală de reflexie internă (TIRFM) și în aplicațiile de fluorescență confocală.

Pași pentru a observa un preparat folosind ulei de imersie

Pentru a vedea o pregătire pentru microscop, priviți mai întâi pregătirea cu obiectivul de mărire mai mică, de obicei 10X, cu intensitate scăzută a luminii.

Apoi, obiectivul de 40X este trecut, iar trecerea luminii este ușor crescută. Unele analize se pot face cu această creștere, dar pentru a vedea detalii structurale aveți nevoie de mărirea de 100X.

Înainte de a merge la obiectivul 100X, o picătură de ulei de imersie este așezată pe hârtie, exact unde doriți să o observați, iar apoi revolverul de la microscop se deplasează pentru a localiza obiectivul de 100x în preparat.

Intensitatea luminii este reglată (crește) (deplasarea condensatorului și deschiderea diafragmei). Apoi, cu unele mișcări mici care sunt date șurubului micrometric (înainte sau înapoi) ar trebui să se concentreze perfect dacă microscopul folosește obiective parafocale.

Dacă încercați să focalizați pregătirea direct cu obiectivul de imersiune, pot apărea probleme în găsirea focalizării. Nu este o acțiune imposibilă, dar dificultatea crește semnificativ.

îngrijire

Pentru a utiliza uleiul de imersie, trebuie luate în considerare anumite condiții.

Când a fost făcut un preparat colorat, cum ar fi un frotiu colorat cu Giemsa sau un Gram, este necesar să așteptați ca frotiu să se usuce complet înainte de a plasa uleiul de imersie. În caz contrar, uleiul împreună cu apa vor forma mieluri care nu vor permite vizualizarea preparatului.

Pe de altă parte, după observarea lotului de preparate, adică la sfârșitul zilei de lucru, obiectivul 100X trebuie curățat cu atenție, folosind o hârtie pentru lentilele de etanol. Dacă obiectivul este lăsat murdar, uleiul se va usca pe el și apoi va fi foarte greu să îl scoateți, dăunând câmpului de vizionare.

De asemenea, trebuie luat în considerare faptul că uleiul este inflamabil și trebuie păstrat departe de sursele de căldură (brichete). Este important să evitați încălzirea acestuia peste 65 ° C.

În cele din urmă, uleiul este un produs toxic. Prin urmare, ar trebui evitat contactul direct cu pielea și cu membranele mucoase, unde poate provoca iritații ușoare. Pentru a evita accidentele, se recomandă folosirea mănușilor și a ochelarilor de protecție pentru ao manipula.

În cazul contactului cu uleiul, zona trebuie spălată cu multă apă. Dacă uleiul stropeste în ochi, ar trebui să fie spălat în același mod, păstrând ochii deschiși. În cazul ingerării accidentale, este important să beți apă caldă și să provocați vărsături, în plus față de cel care va ajunge la cel mai apropiat medic.